पीवीपी जलीय घोल पर पायरोलिडोन के पीएच मान और तापमान का प्रभाव कोशिका संरक्षण में भूमिका निभाता है। उचित संचालन और उचित ठंड की स्थिति सेल विशेषताओं के परिवर्तन या हानि को कम कर सकती है। अनक्रॉसलिंक्ड पीवीपी समाधान में कोई विशेष थिक्सोट्रॉपी नहीं है, जब तक कि एकाग्रता अधिक न हो, इसमें थिक्सोट्रॉपी होगी और एक छोटा विश्राम समय दिखाएगा। सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन अनुभव: सही क्रायोप्रेज़र्वेशन टूल चुनना राजा है। सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन एक ऐसी तकनीक है जो सेल चयापचय को कम करने और दीर्घकालिक भंडारण प्राप्त करने के लिए कम तापमान वाले वातावरण में कोशिकाओं को संग्रहीत करती है। (पाइरोलिडोन) अधिकांश सेल लाइनों में, पीवीपी का मोटा होना प्रदर्शन इसके सापेक्ष आणविक द्रव्यमान से निकटता से संबंधित है। किसी दी गई सांद्रता के तहत, सापेक्ष आणविक द्रव्यमान जितना अधिक होता है, उसकी चिपचिपाहट उतनी ही अधिक होती है। उम्र बढ़ने और विकास के साथ कोशिकाएं जमा होती रहेंगी और बदलती रहेंगी, जिससे फेनोटाइप और जीनोटाइप [जीजी] उद्धरण; संस्कृति बहाव [जीजी] उद्धरण; कोशिकाओं के दीर्घकालिक अनुप्रयोग में सही और सफल क्रायोप्रिजर्वेशन महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।
क्रायोप्रिजर्वेशन प्रक्रिया के दौरान, इसलिए, उचित संस्कृति और कोमल सेल संग्रह। क्रायोप्रिजर्वेशन से पहले, कोशिकाओं को एक अच्छी वृद्धि अवस्था (लॉग चरण या घातीय चरण में) बनाए रखना चाहिए। आदर्श रूप से, फसल की जगह से 24 घंटे पहले माध्यम होना चाहिए। यह सुनिश्चित करने के लिए कि कोशिकाएं दूषित नहीं हैं, संस्कृति के माइक्रोबियल संदूषण, विशेष रूप से माइकोप्लाज्मा को बाहर ले जाने की सिफारिश की जाती है। सेल संग्रह प्रक्रिया में, सेल क्षति से बचने के लिए प्रायोगिक ऑपरेशन जितना संभव हो उतना कोमल होना चाहिए। (पाइरोलिडोन) उपयुक्त क्रायोप्रोटेक्टेंट। वर्तमान में, सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन के लिए आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक लिक्विड नाइट्रोजन क्रायोप्रेज़र्वेशन है। उचित मात्रा में सुरक्षात्मक एजेंट के साथ धीमी ठंड विधि का उपयोग मुख्य रूप से कोशिकाओं को फ्रीज करने के लिए किया जाता है ताकि ठंड प्रक्रिया के दौरान कोशिकाओं को नुकसान कम किया जा सके। यदि कोशिकाओं को सुरक्षात्मक एजेंटों को जोड़े बिना सीधे जमे हुए हैं, तो कोशिकाओं के अंदर और बाहर का पानी जल्दी से बर्फ के क्रिस्टल का निर्माण करेगा, जिससे प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला होगी।
पॉलीविनाइलपाइरोलिडोन, एथिलीन ग्लाइकॉल, मेथनॉल और मिथाइलसेटामाइड सभी क्रायोप्रोटेक्टेंट हैं। आमतौर पर सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन में उपयोग किए जाने वाले डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड (डीएमएसओ) और ग्लिसरॉल हैं। इन दो पदार्थों में छोटे आणविक भार, उच्च घुलनशीलता होती है, और आसानी से कोशिकाओं में प्रवेश कर सकते हैं। वे हिमांक को कम कर सकते हैं और पानी के लिए कोशिका झिल्ली की पारगम्यता में सुधार कर सकते हैं। सेलुलरता के लिए। (पाइरोलिडोन) डीएमएसओ में आमतौर पर 5-10% (वी/वी) की एकाग्रता होती है, और इष्टतम एकाग्रता सेल लाइनों के साथ भिन्न होती है। हिमीकरण माध्यम में ग्लिसरॉल की अंतिम सांद्रता 5-15% है। फिर से, इष्टतम एकाग्रता सेल लाइन पर निर्भर करती है। कोशिकाओं के जीवित रहने की दर में सुधार करने के लिए जिन्हें संरक्षित करना अधिक कठिन है, आप क्रायोप्रेज़र्वेशन के दौरान परिरक्षण समाधान में सीरम सांद्रता को बढ़ाने का विकल्प चुन सकते हैं। यदि आप कोशिकाओं को तेजी से और अधिक स्थिर बनाना चाहते हैं, तो सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन द्रव एक अच्छा विकल्प है। तैयार करने की कोई आवश्यकता नहीं है, बस उचित मात्रा में क्रायोप्रेज़र्वेशन द्रव को सीधे कोशिकाओं में जोड़ें। ऑपरेशन सरल है और आपके पास उच्च व्यवहार्यता वाले सेल हो सकते हैं।